Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀使用要求如下:
一、設(shè)備設(shè)置與啟動(dòng)要求
1.孔板體積與密封
使用封板膜密封孔板,確保至少30μL的過(guò)量溢出體積,防止液體泄漏影響檢測(cè)結(jié)果。
長(zhǎng)期閑置時(shí),需定期運(yùn)行“StartofDay”和“EndofDay”程序(建議每周1-2次),避免設(shè)備性能下降。若超過(guò)一個(gè)月未使用,需排空管路。
2.液體廢棄物管理
運(yùn)行前確認(rèn)兩個(gè)廢棄物容器為空且已正確連接,通過(guò)指示燈驗(yàn)證連接狀態(tài)(移除容器觀察指示燈切換,重新連接時(shí)確認(rèn)閃爍)。
3.耗材與試劑管理
檢查軟件中的槍頭和光盤(pán)計(jì)數(shù)是否與實(shí)際一致,避免耗材不足導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中斷。
使用自動(dòng)掃描儀掃描試劑瓶條形碼,減少人為錄入錯(cuò)誤。
二、Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀操作流程規(guī)范
1.樣品處理
樣品收集、儲(chǔ)存和稀釋需按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行,避免污染或降解影響檢測(cè)靈敏度。
支持多種基質(zhì),但需根據(jù)樣品類(lèi)型調(diào)整預(yù)處理步驟。
2.實(shí)驗(yàn)步驟
磁珠捕獲抗原:利用表面標(biāo)記捕獲抗體的磁珠結(jié)合樣品中的目標(biāo)抗原。
檢測(cè)抗體標(biāo)記:使用生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體標(biāo)記被捕獲的抗原。
酶復(fù)合物結(jié)合:加入鏈霉親和素-半乳糖苷酶復(fù)合物,與檢測(cè)抗體上的生物素結(jié)合。
磁珠與底物混合:將反應(yīng)后的磁珠與底物混合,加載至含微孔陣列的檢測(cè)芯片中。
熒光成像與定量:通過(guò)磁場(chǎng)使磁珠落入微孔,加入油相隔離微孔,利用高分辨率熒光顯微鏡計(jì)數(shù)熒光點(diǎn),依據(jù)泊松分布理論計(jì)算蛋白質(zhì)濃度。
3.多重檢測(cè)能力
同一芯片可同時(shí)檢測(cè)多達(dá)10種目標(biāo)分子,減少樣本與試劑用量,降低成本。
三、Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀運(yùn)行中注意事項(xiàng)
1.避免軟件卡頓
實(shí)驗(yàn)運(yùn)行過(guò)程中避免頻繁操作軟件,防止CPU過(guò)載導(dǎo)致數(shù)據(jù)丟失或設(shè)備故障。
2.反應(yīng)杯加載器堵塞處理
若發(fā)生堵塞,嘗試初始化操作或執(zhí)行“StartofDay”程序,必要時(shí)聯(lián)系技術(shù)支持。
3.錯(cuò)誤信息處理
優(yōu)先查閱分析指南或錯(cuò)誤信息指南進(jìn)行自助故障排除,無(wú)法解決時(shí)聯(lián)系技術(shù)支持。
四、Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀設(shè)備維護(hù)與保養(yǎng)
1.日常清潔
定期清潔設(shè)備表面和內(nèi)部組件,防止灰塵或殘留物影響檢測(cè)精度。
2.校準(zhǔn)與驗(yàn)證
按制造商建議定期校準(zhǔn)設(shè)備,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性(批間變異系數(shù)CVs<10%)。
3.長(zhǎng)期存放
若設(shè)備長(zhǎng)期閑置,需排空管路并存放于干燥、無(wú)腐蝕性氣體的環(huán)境中,避免部件老化。
